sfGFP熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光

sfGFP是superfolder GFP的縮寫，它是一種設計精良的折疊版本的GFP，對化學變性劑和極端溫度顯示更大的耐受力。Superfolder GFP是2005年發(fā)表的一種基本（構成熒光）綠色熒光蛋白，來源于Aequorea victoria。據(jù)報道，它是一種非?？焖俪墒斓娜醵垠w。Superfolder GFP源自Folding Reporter GFP，具有以下突變：S30R/Y39N/N105T/Y145F/I171V/A206V

superfolder GFP的激發(fā)光和發(fā)射光：

sfGFP的激發(fā)光是·485nm，發(fā)射光為510nm

Superfolder GFP EX：485nm，Superfolder GFP EM：510nm

superfolder GFP的激發(fā)光和發(fā)射光的光譜圖

eGFP和GFP的區(qū)別：

GFP（綠色熒光蛋白）是一種在藍光或紫外光下發(fā)出綠色光的蛋白質。它天然存在于水母維多利亞水母中。GFP由238個氨基酸組成。GFP 的大小為 26.9 kDa。GFP 是分子生物學中的強大工具，因為它具有內在的熒光，沒有任何輔助分子。熒光是由于蛋白質的連續(xù)氨基酸的共價重排。蛋白質折疊后，主鏈原子 Ser65、Tyr66 和 Gly67 在 O 2存在下形成高度共軛的平面對羥基苯亞甲基咪唑啉酮發(fā)色團. 晶體結構研究表明，發(fā)色團填充在分子的 β-桶結構的核心內可防止其因順磁氧、水偶極子或順反異構化而猝滅。此外，發(fā)色團與相鄰分子的非共價相互作用增強了其光譜特性。

EGFP（增強型綠色熒光蛋白）是野生型 GFP 的變體，相對于 GFP 具有更高強度的發(fā)射。它是個也是重要的 GFP 變體之一。兩個突變 F64L 和 S65T 在 37 °C 下產生具有更高折疊效率的 EGFP。有趣的是，由于 S65T 對 395 nm 峰的抑制，EGFP 在 ~490 nm 處具有單個激發(fā)峰，因為它調節(jié)附近 Glu222 的電離狀態(tài)。另一方面，F(xiàn)64L 提高了 37 °C 時的折疊效率。重要的是，EGFP 的密碼子序列針對在哺乳動物細胞中的表達進行了優(yōu)化。

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