美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀

UCL-3200紫外交聯(lián)儀

美國路陽公司（LUYOR）的UCL-3200/3500紫外交聯(lián)儀是安裝6根短波254nm紫外線燈管的短波紫外交聯(lián)儀，設(shè)計實用，用途廣泛。采用智能微處理控制系統(tǒng)和實時紫外監(jiān)測系統(tǒng)?？梢愿?、更的安全地得到可靠無誤的結(jié)果，減少無須的調(diào)整時間，不必要的重復(fù)過程和不期望的樣品污染。美國路陽公司（LUYOR）的UCL-3500紫外交聯(lián)儀是使這些創(chuàng)新性儀器成為客戶需要的設(shè)備。 

UCL-3200紫外交聯(lián)儀的原理，在254nm波長的紫外線照射下核酸與蛋白質(zhì)產(chǎn)生共價鍵，核酸能鉚釘在硝酸纖維素膜上，因此使用254nm的紫外交聯(lián)儀，可以確保核酸交聯(lián)到尼龍膜上。

由于UCL-3200紫外交聯(lián)儀配置了一種紫外能量程序控制系統(tǒng)（Joules/cm2）,即其中的時間積分儀連續(xù)檢測紫外光的照射。當(dāng)能量吸收值達(dá)到設(shè)定值時，照射將自動停止。所以不管紫外光源強(qiáng)弱與否、時間差異與否，照射循環(huán)均有很好的重復(fù)性。

UCL-3200紫外交聯(lián)儀是一種多用途的短波254mm紫外輻射系統(tǒng)主要用于將核酸交聯(lián)于膜上。還可用于瓊脂糖凝膠中DNA的切割、RecA突變篩選、嘧啶二聚體產(chǎn)生的部分限制性內(nèi)切酶消化、UV滅菌消除PCR污染等。在紫外滅菌、聚合物紫外處理等方面也有應(yīng)用價值。

UCL-3200/3500為254nm的短波紫外交聯(lián)儀

UCL-3200M/3500M為302nm的中波紫外交聯(lián)儀

UCL-3200L/3500L為365nm的長波紫外交聯(lián)儀

產(chǎn)品應(yīng)用

紫外線誘發(fā)的突變
 膜交聯(lián)
 生物分子交聯(lián)
 紫外線劑量已校準(zhǔn)

下面表格為紫外交聯(lián)儀能量換算方法：

紫外交聯(lián)儀的UV能量單位換算公式如下：

能量單位： 焦耳（J）

光強(qiáng)的能量單位：J/m2 , mJ/ cm2，即單位面積上的光能量

1焦耳(J) = 1牛頓/米=1瓦特(W)/秒(S)

1J/cm2   =  1000mJ/ cm2   = 1000000uJ/ cm2

1J/m2   =  1000mJ/ m2 = 1000000uJ/m2

1J/m2   =   0.1mJ/ cm2

紫外線強(qiáng)度單位：mw/cm2和w/m2如何換算？

1W/m2=103 mW/m2 =106uW/m2

1W/m2 =1000mW/ 10000cm2 =0.1mW/cm2=100 uW/cm2

1 W/m2 = 0.1 mW/cm2

1 mW/cm2 =1000 uW/cm2 =10 W/m2

美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀產(chǎn)品特點

內(nèi)置紫外輻射計可實現(xiàn)自動測量
 安全聯(lián)鎖裝置，防止用戶意外暴露在紫外線下
 能夠提供10 J / cm 2 的UVA，UVB或UVC
 高度均勻的表面照明
尺寸緊湊，可容納有限的實驗室空間

做紫外線輻照箱使用

UCL-3200提供接近均勻的UVC光，其均勻度誤差小于10％ ，UCL-3200具有UVC劑量的實時監(jiān)控功能，以確保可重復(fù)使用的劑量，而不受空間和時間的影響。

固定核酸到膜上
UCL-3200是一個微處理器控制的UV照射系統(tǒng)，專用于核酸與膜的連接，適用于Southern，Northern，Dot和Slot Blot應(yīng)用。它也可以用于紫外線和消除PCR污染。

微處理器控制的再現(xiàn)性
 可編程微處理器一直監(jiān)控紫外線的發(fā)射。當(dāng)達(dá)到設(shè)定的能量時，輻照將立即停止。因此，可以補(bǔ)償由于紫外線燈管老化而導(dǎo)致的UV強(qiáng)度降低的影響。

耐用性
不銹鋼輻射室和鏡面花紋鋁制紫外線反射板，確保紫外線的均勻性，腔體頂部的紫外線傳感器不易被污染。

易于使用
 大型顯示器提供了一系列預(yù)定義的方法，使UCL-3200成為易于使用切功能強(qiáng)大的儀器，用于將核酸固定在膜上。編程的數(shù)據(jù)顯示在LED顯示屏上。

美國路陽UCL-3200紫外交聯(lián)儀技術(shù)數(shù)據(jù)

UCL-3200/3500快速操作指南

按照能量輻照：

按壓Program按鍵，Energy led綠燈亮，通過數(shù)字鍵盤輸入能量值，按Enter確定，按Star開始。

按照時間輻照：

按壓Program按鍵，Time led紅燈亮，通過數(shù)字鍵盤輸入時間值，按Enter確定，按Star開始。例如：輻照55分鐘15秒，輸入：55.15即可。

9組預(yù)設(shè)方法：

能量預(yù)設(shè)置模式：

A: 按Program選擇能量模式，通過數(shù)字按鍵輸入能量值,單位是焦耳（例如10J），按Enter按鍵，

B:再按preset（藍(lán)燈亮），按Enter按鍵，顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預(yù)置通道3（1-9）.

使用預(yù)設(shè)能量值照射步驟：

A:按Program選擇能量模式，按Preset（preset燈亮），再數(shù)字鍵盤上按存儲的通道數(shù)（3）,顯示屏將顯示預(yù)設(shè)能量值（10J）

B:按start，開始照射。

時間預(yù)設(shè)值模式：

A:按Program]選擇時間模式，(time）紅色led燈亮。通過數(shù)字按鍵輸入需要設(shè)置的時間1.11（以分鐘和十分之一分鐘為單位），按Enter。

B:再按Preset按鍵（preset燈亮），按Enter按鍵，顯示屏顯示P.在數(shù)字按鍵選擇預(yù)置通道3（1-9）.

使用預(yù)設(shè)時間值照射步驟：

A:按Program選擇time模式，按Preset（preset燈亮），再數(shù)字鍵盤上按存儲的通道數(shù)（3）,顯示屏將顯示1.11

B:按Start，開始照射。

時間設(shè)置說明：

XXX.X時候，zui大輸入值為599.5分鐘，599為599分鐘，0.5代表為5x1/10, 0.1代表為6秒鐘，XX.XX時候，zui大輸入值為99.59分鐘。

如何設(shè)置小于60秒為單位的照射時間：

按Program選擇time模式，按小數(shù)點按鍵，再按要設(shè)置的秒數(shù)，比如:要照射55秒，在鍵盤上輸入0.55即可。42秒，在鍵盤上輸入0.42即可。如果是1分30秒，要輸入1.30，如果是1分45秒，要輸入1.45.

注意：小數(shù)點后面大只能選擇1-5, 6-9是無法輸入的。

紫外交聯(lián)儀的紫外線強(qiáng)度和能量換算

紫外能量換算：

1 J/cm2= 1,000 mJ/cm2= 1,000,000 uJ/cm2 = 10,000 J/m2

紫外強(qiáng)度換算：

1 W/cm2=1,000 mW/cm2= 1,000,000μW/cm2 = 10,000 W/m2

能量（mJ/cm2）=強(qiáng)度（mW/cm2）x 時間(秒sec)

常用轉(zhuǎn)膜能量：120000uJ/cm2 =120 mJ/cm2 =0.12 J/cm2

UCL-3200紫外交聯(lián)儀快速操作指南.pdf

紫外交聯(lián)儀用于Southern印跡雜交

Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。其基本原理是：具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補(bǔ)的原則特異性地雜交形成雙鏈。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外交聯(lián)儀的紫外線照射固定，再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測特定DNA分子的含量  。

由于核酸分子的高度特異性及檢測方法的靈敏性，綜合凝膠電泳和核酸內(nèi)切限制酶分析的結(jié)果，便可繪制出DNA分子的限制圖譜。但為了進(jìn)一步構(gòu)建出DNA分子的遺傳圖，或進(jìn)行目的基因序列的測定以滿足基因克隆的特殊要求，還必須掌握DNA分子中基因編碼區(qū)的大小和位置。有關(guān)這類數(shù)據(jù)資料可應(yīng)用Southern印跡雜交技術(shù)獲得。

Southern印跡雜交技術(shù)包括兩個主要過程：一是將待測定核酸分子通過一定的方法轉(zhuǎn)移并結(jié)合到一定的固相支持物（硝酸纖維素膜或尼龍膜）上，即印跡（blotting）；二是固定于膜上的核酸與同位素標(biāo)記的探針在一定的溫度和離子強(qiáng)度下退火，即分子雜交過程。該技術(shù)是1975年英國愛丁堡大學(xué)的E.M.Southern首創(chuàng)的，Southern印跡雜交故因此而得名。早期的Southern印跡是將凝膠中的DNA變性后，經(jīng)毛細(xì)管的虹吸作用，轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。印跡方法如電轉(zhuǎn)法、真空轉(zhuǎn)移法；濾膜發(fā)展了尼龍膜、化學(xué)活化膜（如APT、ABM纖維素膜）等。利用Southern印跡法可進(jìn)行克隆基因的酶切、圖譜分析、基因組中某一基因的定性及定量分析、基因突變分析及限制性片斷長度多態(tài)性分析（RFLP）等。

紫外交聯(lián)儀為什么有人稱為DNA紫外交聯(lián)儀，核酸紫外交聯(lián)儀？

紫外交聯(lián)儀主要用于Northern和Southern印跡雜交實驗中將DNA或RNA從凝膠轉(zhuǎn)移到尼龍膜后固膜。

Northern印跡雜交（Northern blot）。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建，稱為Southern印跡技術(shù)，RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對應(yīng)，故被稱為Northern印跡雜交，與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。

Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測特定DNA分子的含量。

DNA是核酸的一種，核酸包括DNA和RNA。核酸的功效與作用是合成蛋白、維持機(jī)體免疫反應(yīng)和抗氧化，核酸是一種生物大分子，在蛋白質(zhì)的復(fù)制和合成中既儲存和傳遞遺傳信息的作用，能夠維持機(jī)體正常的免疫反應(yīng)，具有一定抗氧化的作用，還能夠促進(jìn)細(xì)胞的分化以及影響生物合成，又能夠促進(jìn)身體營養(yǎng)的吸收和利用。

斑點雜交（dot blot）是指將待測的DNA變性后點加在硝酸纖維素膜（或尼龍膜、NC膜）上，用已標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交，洗膜（除去未接合的探針），放射自顯影，判斷是否有雜交及其雜交強(qiáng)度，主要用于基因缺失或拷貝數(shù)改變的檢測。

狹縫斑點雜交（slot blot）：也是廣義dot blot的一種。圓點的形狀因為點很小后期不利于光密度分析，并且孔不易清洗徹底。從點雜交角度來說，狹縫與斑點印跡沒有區(qū)別，只是終印跡形狀不同。如果覺得自己樣品量不大，擔(dān)心樣品不能填滿狹縫其實也不是問題，因為不填滿狹縫也不影響雜交結(jié)果，多是狹縫長短不整齊，另外，通過稀釋樣品填滿狹縫以后再做雜交，后印跡雜交結(jié)果不受影響。

紫外交聯(lián)儀英文：ultraviolet crosslinker簡稱：UV crosslinker