臺式紫外線燈XX-15C來進(jìn)行菌種誘變育種

使用XX-15C紫外線燈來進(jìn)行菌種誘變育種

美國路陽公司生產(chǎn)的XX-15C臺式紫外線燈，安裝有2根15w 254nm，鏡面鋁合金反光板，隔板可調(diào)臺式支架，是實驗室紫外照射的便捷工具。

波長254nm的紫外線，正好是食用菌遺傳變異物質(zhì)一核酸的吸收髙峰，菌種細(xì)胞即使受到紫外線的輕度照射，也會使遺傳物質(zhì)一一脫氧核糖核酸（DNA）發(fā)生巨大的變化。 常見的變化有：DNA鍵的斷麵,氫鍵飭斷裂，嘧啶的水合化， 胸腺嘧啶二聚體的形成，八分乇內(nèi)和分子間的交聯(lián)等。 所以，紫外線是誘導(dǎo)食用菌,其它搟生物菌種發(fā)生變異的誘變劑，在誘變的基礎(chǔ)上，就可能選育出優(yōu)良的菌種來。

用XX-15C臺式紫外線燈進(jìn)行紫外線誘變育種，首先應(yīng)準(zhǔn)備孢子懸浮液。將新鮮食用菌無菌孢子移入5毫升無菌生理食鹽水（經(jīng)滅菌處理 的0.9%溶液），或磷酸緩沖溶液（由15克磷酸氫二鈉和2克磷酸二氫鉀共溶于1000亳升經(jīng)滅菌而得的蒸餾水）中，搖勻后即成孢子懸浮液，萁濃度以每毫升含孢子100萬至1億 個為宜。

誘變時，在暗室內(nèi)開啟XX-15C臺式紫外線燈，調(diào)整紫外線燈臺式支架的隔板高度。開始先開燈20分鐘，波長穩(wěn)定后取5亳升孢子懸浮液 倒入直徑6厘米的無菌培養(yǎng)皿中，揭開皿蓋，搖動培養(yǎng)皿， 使照射均勻，照射時間0.5—1.0分鐘，照射后的抱子懸浮液每毫升含活孢子數(shù)在10—1000萬個之間。要得到單菌落，得 先用無菌水樣釋至每亳升10—100個，再取稀釋液0.2毫升， 涂布于裝有瓊脂的培養(yǎng)皿上，在25℃溫度下培育5—10天， 待菌落出現(xiàn)后，選純正、健壯的單菌落移入斜面試管培養(yǎng)， 并做拮抗試驗。

拮抗試驗是取處理和未處理的菌絲各一塊，接在同一斜面上，相距1 一2厘米，如處理后的孢子已發(fā)生變異，其菌絲與未處理的菌絲在相接處就會發(fā)生拮抗，形成一條明顯的拮抗線；若未發(fā)生變異，則兩方面的菌絲相連接成一體。

XX-15C臺式紫外線燈支架有多個檔位可以調(diào)節(jié)，方便老師做不同距離、不同強度的紫外線誘變照射實驗

美國路陽 XX-15A/XX-20A/XX-40AA實驗室用紫外線燈

文章轉(zhuǎn)自：http://www.luyor.cn/news/case/560.html 

紫外交聯(lián)儀UCL-3500用做紫外誘變箱，紫外誘變儀

紫外誘變育種的原理是什么？

誘變育種決定生物遺傳物質(zhì)DNA的吸收光譜（200-300nm）處于紫外線光譜中。當(dāng)生物的DNA吸收紫外線后，分子機構(gòu)發(fā)生很大變化，這種變化可能會導(dǎo)致DNA遺傳性大幅度的改變，并在多數(shù)情況下因為這種改變導(dǎo)致細(xì)胞無法正常繁殖和代謝而在短期內(nèi)死亡，但少量存活細(xì)胞中包含的基因突變并具有一定的存活能力，提取這些細(xì)胞經(jīng)過一段的培養(yǎng)，可以選擇出有益的變異株加以擴大培養(yǎng)，從而得到希望的品種。

用哪個波段紫外線進(jìn)行紫外誘變育種？

紫外交聯(lián)儀UCL-3500內(nèi)置了6根254nm紫外線燈管，紫外輻照均勻，可以根據(jù)自己需要設(shè)定輻照時間，也可以根據(jù)能量設(shè)置輻照能量值。

紫外誘變育種能量是多少？

因不同細(xì)胞的吸收能量不同，照射能量由實際育種要求而定，通常，需要控制發(fā)生突變的且能存活下來的比例在10-50%即可。

微生物育種的目的就是要人為地使某些代謝產(chǎn)物過量積累,把生物合成的代謝途徑朝人們所希望的方向加以引導(dǎo),或者促使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生基因的重新組合優(yōu)化遺傳性狀,獲得所需要的高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)和低耗的菌種。誘變和篩選則是微生物育種的兩個主要環(huán)節(jié)。

 育種可分為自發(fā)性突變育種和誘發(fā)突變育種。但是自發(fā)突變的頻率很低，一般在 10 -6 ~10 -10 ，而誘變育種頻率較高。誘變育種就是利用物理和化學(xué)誘變劑處理均勻分散的微生物細(xì)胞群，大幅度提高突變頻率，然后設(shè)法采用簡便、快速和高效的篩選方法，從中挑選少數(shù)符合育種目的的突變株。誘變育種除能提高產(chǎn)量外，還可達(dá)到改進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量、擴大品種和簡化生產(chǎn)工藝等目的，是目前廣泛使用的育種手段。

 誘變育種主要通過物理誘變劑（如：紫外線、X-射線、γ-射線、快中子、激光、超聲波等）和化學(xué)誘變劑（如亞硝酸、硫酸二乙酯、亞硝基胍、吖啶類染料等）處理微生物群體細(xì)胞，通過合理的篩選程序和方法，從中選出遺傳物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的少數(shù)細(xì)胞。常利用形態(tài)突變型、生化突變型、條件致死突變型和致死突變型進(jìn)行初篩而獲得優(yōu)良性狀的突變株。誘變育種方法簡便，容易掌握，仍是目前行之有效的一種重要育種手段，但自覺性、方向性差。

物理誘變因子中以紫外線輻射的使用為普遍，其他物理誘變因子則受設(shè)備條件的限制，難以普及。一般用于誘變育種的物理因子有快中子、60Co、γ-射線和高能電子流β-射線等。紫外線作為物理誘變因子用于工業(yè)微生物菌種的誘變處理具有悠久的歷史，盡管幾十年來各種新的誘變劑不斷出現(xiàn)和被應(yīng)用于誘變育種，但到目前為止，對于經(jīng)誘變處理后得到的高單位抗生素產(chǎn)生菌種中，有80%左右是通過紫外線誘變后經(jīng)篩選而獲得的。因此，對于微生物菌種選育工作者來說，紫外線作為誘變因子還是應(yīng)該首先考慮的。

紫外線可以引起的 DNA 損傷，可使同鏈 DNA 的相鄰嘧啶間形成共價結(jié)合的胸腺嘧啶二聚體，二聚體的出現(xiàn)會減弱雙鏈間氫鍵的作用，并引起雙鏈結(jié)構(gòu)發(fā)生扭曲變形，阻礙堿基間的正常配對，從而可能引起突變或死亡。

在傳統(tǒng)的物理誘手段中，紫外線誘變由于有設(shè)備簡單，誘變效率高,操作安全簡便等特點而被廣泛應(yīng)用。經(jīng)大量實驗證明利用紫外誘變的方法能選育出大量產(chǎn)量高，活性強的優(yōu)良微生物菌種。本實驗將利用紫外誘變法，篩選出利福平抗性更高的菌株。